پودر قطعه شویی خرید پودر نانو
پودر قطعه شویی خرید پودر نانو
بسیاری از مطالعات ایمونوسیتوشیمیایی نشان داده اند که محلی سازی درون سلولی گیرنده های NMDA و AMPA
با بلوغ سیناپسی در داخل بدن و در شرایط آزمایشگاهی w2،7،8،18،21 x تغییر کرد. در مطالعه حاضر، به منظور درک فرآیند بلوغ محلی سازی درون سلولی و خواص بیوشیمیایی گیرنده های گلوتامات، ما تغییرات رشدی در خواص نامحلول در مواد شوینده زیر واحدهای گیرنده NMDA و AMPA را با تجزیه و تحلیل سطوح زیر واحد گیرنده در هر دو ماده شوینده بررسی کردیم. غشاهای سیناپسی تصفیه نشده و استخراج شده با مواد شوینده
موش های باردار Sprague-Dawley در اتاقی قرار گرفتند که در آن نور و دما به شدت کنترل می شد. روز تولد به عنوان روز پس از تولد PND در نظر گرفته شد.
0. در مجموع 26 حیوان در PND 1 n s11.، PND 8 n s8.، PND 15 n s4 قربانی شدند. و PND 22 n s3. در یک آزمایش و سه آزمایش جداگانه دیگر انجام شد. قشر مغز از جمله تشکیلات هیپوکامپ جمع آوری، با یخ خشک منجمد شد و تا زمان استفاده در دمای 70_C نگهداری شد. مغزها در هشت جلد ساکارز بافر HEPES 0.32 مولار ساکارز، 10 همگن شدند.
بافر MM HEPES
pH، 7.4 ..، و هموژنه در 800 = گرم به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد. مایع رویی مجدداً در 16000 = گرم به مدت 20 دقیقه تریفیوژ شد و گلوله حاصل با ساکارز بافر بی کربنات 0.32 مولار ساکارز، 1 میلی مولار بی کربنات سدیم، pH، 8.0 مجدداً معلق شد. و دوباره همگن شد. گلوله های معلق مجدد به دقت روی یک شیب ناپیوسته حاوی 0.85 Mr1.0 Mr1.2 M ساکارز قرار گرفتند و در 85000 سانتریفیوژ شدند.
= گرم به مدت 2 ساعت بخش های غشای سیناپسی در لایه بین 1.0 و 1.2 مولار ساکارز بازیابی شدند و در 3 حجم 80 میلی مولار Tris بافر pH 8.0 مجدداً معلق شدند و در 36000 = گرم به مدت 30 دقیقه سانتریفیوژ شدند. گلوله ها با بافر تریس 40 میلی مولار مجدداً معلق شدند و در دمای y70_C نگهداری شدند.
20 میکروگرم کسر غشای سیناپسی با 300 _ لیتر بافر استخراج تریتون 40 میلیمولار Tris، 150 میلیمولار NaCl، 1 میلیمولار EDTA، 2.5 میلیمولار سدیم پیروفسفات، 1 _grml Leupeptin، 0.1 میلیمولار تریتون، 0.1 میلیمولار، 1 میلیمولار تریس، 1 میلیمولار، پروفسفات سدیم تیمار شد. . در یخ به مدت 15 دقیقه با گرداب متناوب. مخلوط استخراج در 16000 = گرم به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد و گلوله ها با بافر استخراج تریتون 0.5 درصد شسته و دوباره سانتریفیوژ شدند. گلوله ها در 2 = سدیم دودسیل سولفات SDS جوشانده شدند.
Comments
Post a Comment